本试剂为国家标准快速检验方法GB/T5009.199-2003的配套试剂。酶活性和对农药的灵敏度指标均达到或超过了国家标准要求，可以在各种型号的农药残毒检测仪(分光光度法)上使用，具有稳定性好、灵敏度高和使用方便等特点。

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更新时间：2015-07-06

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产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

急性中毒快速检测类

过氧化氢快速检测类农药残留速测卡农药测定浸提液（固体）农药残留速测光度计通用酶试剂 * *对照液（乙酸乙酯介质）敌鼠钠盐速测包敌鼠钠盐对照品安妥检测试纸（鼠药）亚硝酸盐NaNO2对照液甲醇速测试剂盒甲醇对照液乙醇对照液（与酒醇速测仪配套使用）砷、锑、铋、汞、银化物检测试剂重金属砷快速检测试剂盒砷对照液重金属汞快速检测试剂盒汞对照液食物中钡速测试剂包重金属铅速测试剂包/盒食用油酸价、过氧化值速测试纸桐油鉴别试剂桐油对照品大嘛油鉴别试剂巴豆油鉴别试液矿物油鉴别试剂蓖麻油鉴别试剂生熟豆浆速测试剂有毒豆角速测试剂盒

产品介绍

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残毒快速检测

酶抑制率法（分光光度法）试剂使用说明

本试剂为国家标准快速检验方法GB/T5009.199-2003的配套试剂。酶活性和对农药的灵敏度指标均达到或超过了国家标准要求，可以在各种型号的农药残毒检测仪（分光光度法）上使用，具有稳定性好、灵敏度高和使用方便等特点。
一、试剂配制
1. 缓冲液试剂：整包倒入大烧杯中，加1000mL纯净水溶解，酸碱度为pH8.0，常温保存；
2. 乙酰胆碱酯酶：取一支酶粉加20mL缓冲溶液溶解，4℃冰箱中保存，一周内用完。也可将溶解后的酶液分成几个小瓶，将其冷冻，用时融化，但不能重复多次冷冻、化解。
3. 显色剂：取一支显色剂加入20mL缓冲溶液，避光保存；
4. 底物：取一支底物加20mL缓冲溶液，摇匀后置4℃冰箱中保存；
二、分析步骤
1. 样品处理：选取有代表性的蔬菜样品，冲洗掉表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取样品1g，（非叶菜类取2g）放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，手摇振荡1～2分钟，或超声波振荡30秒钟，倒出提取液，静置3~5min，待用。
2. 对照溶液测试：先于试管中加入100微升酶液和100微升显色剂，再加入2.5mL缓冲溶液，摇匀后于37°C放置15min，加入100微升底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入仪器比色池中，记录初始吸光度A₁和反应3 min时的吸光度A₂，A₂-A₁=DA₀。
3. 样品溶液测试：先于试管中加入100微升酶液和100微升显色剂，再加入2.5mL样品提取液，其它操作与对照溶液测试相同，记录初始吸光度A₁和反应3 min时的吸光度A₂，A₂-A₁=DA_t。
三、结果计算
结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。
抑制率（%）=[ （DA₀-DA_t）/ DA₀]×100
当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50%时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。
对阳性结果的样品，可用其它方法进一步确定具体农药品种和含量。
四、注意
1. 每批样品的控制时间、温度条件必须与对照溶液的条件**。
2. 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，不要剪的太碎。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也不要剪的太碎。
3. 当温度条件低于37°C，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶对照溶液测试得到的吸光度A₂-A₁≥ 0.3以上，即可往下操作。当对照溶液酶液的加入量大一些时，也可使A₂-A₁≥0.3以上。
4. 当吸光度大到无法读取时，说明测定液浑浊有干扰。
五、产品有关技术指标
1. 代表性农药的检出下限见下表

农药名称

检出限mg/kg

标准要求检出限mg/kg

甲胺磷

0.65

2.0

氧化乐果

0.5

0.8

敌敌畏

0.01

0.1

呋南丹

0.01

0.3

2. 乙酰胆碱酯酶的活性：（室温20°C以上进行实验）DA₀≥0.3。
六、包装及保存条件
每包可做200份样品，0°C以下冰箱冷冻保质期为三年，配成试剂后保存期为一周